核酸酶生成的频繁

alamin447@qq.co

倍体83 、 84 ,染色体丢失85 ,86、87和p53激活可以富集致癌细胞88、89、90 。CRISPR-Cas9 编辑的其他结果包括外源序列的整合，包括慢病毒55 , 57 , 91，腺相关病毒 (AAV) 56 , 92，质粒25 , 57 , 78 , 80 , 93 , 94和小 DNA 片段44 , 95。最近，我们报道了 LINE-1 逆转录转座子可以以逆转录酶 (RT) 活性依赖性和核酸内切酶 (EN) 共有基序独立的方式出现在 CRISPR-Cas9 编辑位点57。这些事件利用 CRISPR–Cas9  DS

B 的可用性，有利于使用微同源介导的末端连接 (MMEJ) 25 , 57 , 92 , 96插入外源 DNA 片段。尽管染色体重排可能是罕见事件，但令人担忧的是，即使是极少数含有这些有害事件的 CRISPR-Cas9 编辑细胞也可能亚洲手机号码列表在体内克隆扩增97并导致疾病。 减少脱靶效应和基因组重排的方法 减少脱靶效应的方法是优化 CRISPR-Cas 系统的不同组件。选择具有

高编辑效率和低脱靶活性的 sgRNA 可能是提高安全性的首选策略，尤其是对于临床应用。此外，还开发了多种修饰，以减少 CRISPR 核酸酶诱导的脱靶效应和基因组重排，同时保留强大的靶向活性，包括 sgRNA 修饰、Cas9 蛋白优化、Cas9 系统修饰和递送改进。 截短的 sgRNA (tru-gRNA)（仅含 17 或 18 个核苷